新算法捕捉活体标本复杂的三维光散射信息

发布时间:2023-08-16 00:00:00 阅读数: 28

上皮细胞。资料来源:波士顿大学 Jiabei Zhu

研究人员开发了一种新算法,用于恢复表现出多种光散射的生物样本的三维折射率分布。该算法有助于优化一种称为强度衍射断层扫描(IDT)的新成像方法。

波士顿大学的 Jiabei Zhu 将在 Optica 成像大会上介绍这项研究。这次混合会议将于 2023 年 8 月 14 日至 17 日在马萨诸塞州波士顿举行。

"三维定量相位成像(QPI)在生物医学成像领域的各种应用中具有优越的特性。作为一种无标记技术,QPI 可以对透明的生物体和细胞进行成像,而无需使用外源性造影剂和染料,因为外源性造影剂和染料会产生光毒性效应,对样本造成损害,"Zhu 解释说。

"与传统的相位对比和微分干涉对比显微镜相比,QPI 不仅能提供高对比度的形态信息,还能提供定量的相位信息。具体来说,三维 QPI 可以提供样品内部高分辨率的三维折射率(RI)分布。这些宝贵的信息可以促进血液学、神经学和免疫学的研究,有助于疾病和感染的诊断。"

虽然三维成像技术可用于研究厚厚的生物样本,但实现高速采集和高分辨率是一项挑战。IDT 方法是一种无标记相位层析技术,有助于克服这一限制。这些技术可以使用可编程的 LED 阵列来实现,这种 LED 阵列很容易添加到标准显微镜中。

Zhu的研究团队最近开发了两种IDT方法,即环形IDT(aIDT)和复用IDT(mIDT),它们提高了图像采集速度,足以实现动态生物样本的可视化。环形 IDT(aIDT)使用与物镜数值孔径相匹配的 LED 环形,而多重 IDT(mIDT)使用多个 LED 同时照亮样品。

研究人员发现,由于使用高数值孔径物镜,现有的 IDT 重建算法不能很好地与他们的新方法配合使用,于是他们决定开发一种新算法。该算法使用了基于分步非同轴(SSNP)方法的多重散射模型,该方法是最近为克服光学衍射层析成像中的类似限制而开发的。

研究人员的研究表明,使用 aIDT 对口腔上皮细胞应用新的 IDT 重建算法,可以轻松区分不同深度的细胞,重建细胞边界和细胞膜,并可视化细胞周围的原生细菌。

他们还使用 mIDT 将其应用于厚厚的多散射活体秀丽隐杆线虫胚胎。重建后的图像显示了蠕虫折叠的细节,单深度横截面显示了细胞轮廓、颊腔和蠕虫尾部的形态细节。

总之,实验表明,通过将 SSNP 方法扩展到 IDT,研究人员能够获得大视野的高质量图像。
 

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